AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN SITOTOKSISITAS EKSTRAK KALUS BIJI JERUK PURUT (Citrus hystrix DC.) PASCA ELISITASI SINAR UV-B DAN LED TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D

MUHAMMAD ILHAM F, Woro Anindito Sri Tunjung, S.Si., M.Sc., P.hD;Dr.rer.nat. Ari Indrianto, S.U.

2017 | Tesis | S2 Biologi

Indonesia termasuk negara dengan prevalensi kanker payudara yang cukup tinggi dan pengobatan medis bersifat multidrug resistance. Pemakaian obat tradisional menjadi pengobatan alternatif yang lebih aman dan efek samping yang lebih rendah. Jeruk purut digunakan sebagai obat tradisional karena mengandung senyawa bioaktif. Namun faktor lingkungan menyebabkan kandungan senyawa bioaktif dapat berubah-ubah. Kultur in vitro kalus merupakan salah satu cara membuat kondisi menjadi lebih seragam dan terkontrol. Tujuan penelitian ini untuk meningkatkan kandungan senyawa bioaktif dengan menggunakan elisitasi sinar UV-B dan LED. Metode yang digunakan meliputi: induksi kalus menggunakan medium MS kombinasi ZPT 2,4 D dan BAP, elisitasi sinar UV-B dan lampu LED putih, uji viabilitas sel dengan Flourescent diacetat, ekstraksi kalus dan analisis senyawa dengan GC-MS. Ekstrak kalus biji jeruk purut juga diuji aktivitas antioksidan DPPH dan uji sitotoksisitas MTT Assay terhadap sel kanker T47D. Uji regresi probit digunakan untuk menentukan nilai IC50 sifat antioksidan dan anti kanker terhadap sel T47D. Hasil penelitian berupa morfologi kalus biji jeruk purut (Citrus hystrix DC.) pasca elisitasi sinar UV-B menunjukkan sifat kalus lebih kompak, mengalami browning, disertai peningkatan pertambahan berat basah kalus diduga penimbunan senyawa senyawa bioaktif serta viabilitas sel lebih tinggi dibandingkan kontrol. Perlakuan elisitasi sinar UV-B dan lampu LED putih selama 2, 4 dan 6 jam meningkatkan jenis senyawa melalui analisis GC-MS dengan jumlah peak tertinggi yaitu 10 peak, 30 peak dan 37 peak . Dominansi senyawa semua perlakuan berupa golongan asam lemak. Jenis senyawa yang terdeteksi pada ekstrak terdiri dari beberapa senyawa VOC (Volatile Organic Compound) seperti flavonoid, terpenoid, aldehid, phytosterol, alkana, alkohol serta senyawa jalur fenol dan fenil propanoid. Nilai IC50 pada aktivitas antioksidan menunjukkan elisitasi paparan sinar UV-B 4 jam memberikan nilai IC50 terendah yaitu 274 mikrogram/ml dibandingkan perlakuan lainnya. Sitotoksisitas ekstrak kalus biji jeruk purut (Citrus hystrix DC.) pada sel T47D memberikan efek penghambatan pertumbuhan sel T47D dengan nilai dosis NIlai IC50 kurang dari 1000 yaitu perlakuan UV-B 2 jam sebesar 613 mikrogram/ml dan UV-B 6 jam sebesar 844 mikrogram/ml. sedangkan pada perlakuan UV-B 4 jam dan LED 6 jam belum bersifat toksik dengan nilai dosis Nilai IC50 lebih dari 1000 mikrogram/ml.

Indonesia is a country with high prevalence of breast cancer and medical treatment is multidrug resistance. Traditional medicines aplication become safer alternative treatment and has lower side effects. Kaffir lime used as a traditional medicines because it contains bioactive compound. However, environmental factors influence of bioactive compound in a plant. In vitro culture callus is one of solution to make the condition more uniform and controlled. The study aim was to increase the content of bioactive compounds by using UV-B and LED light elicitation. The methods used include: callus induction using MS medium combination of 2,4 D and BAP growth hormone, UV-B light elicitation and white LED light, cell viability tested using Flourescent diacetate, callus extraction and compound analysis tested using GC-MS. kaffir lime seeds callus extract also tested the antioxidant activity by DPPH and MTT Assay cytotoxicity test to T47D cancer cells. Analysis used the probit regression test to determine the IC50 value of antioxidant and anti-cancer properties against T47D cells. The results of morphology of kaffir lime seed (Citrus hystrix DC.) callus Post elicitation of UV-B rays showed more compact, browning, with increased weight of callus wet thought to accumulate compound bioactive compound and higher of cell viability than control. The UV-B light elicitation treatment and white LED for 2, 4 and 6 hours exposure increased the compound type through GC-MS analysis with the highest peak numbers of 10 peak, 30 peak and 37 peak. The bioactive compound found in this research mostly fatty acids group. The type of compound detected in the extract consists of several VOC (Volatile Organic Compound) such as flavonoids, terpenoids, aldehydes, phytosterols, alkanes, alcohols as well as phenol and phenyl propanoid pathway compounds. In IC50 antioxidant activity of Citrus hystrix DC. seed callus extract showed the elicitation of 4 hours of UV-B light exposure gave the lowest IC50 value of 274 microgram/ml compared to other treatment. The cytotoxicity of kaffir lime seed (Citrus hystrix DC.) callus extract gave T47D cell growth inhibition effect with IC50 less than 1000 dosage value i.e 2 hours UV-B treatment of 613 microgram/ml and UV-B 6 hours at 844 microgram/ml . 4 hours UV-B and 6 hours LED is not toxic with dosage value IC50 more than 1000 microgram/ml.

Kata Kunci : Citrus hystrix DC., Callus, elicitation, antioxidant, citotoxixity