POTENSI ANTIMALARIA EKSTRAK ACTINOMYCETES DARI SEDIMEN LAUT : KAJIAN AKTIVITAS ANTIPLASMODIUM DAN TOKSISITASNYA SECARA In Vitro

SUDARMAN RAHMAN, Prof. Dr. Mustofa, M.Kes., Apt.; Dr.rer.nat. Triana Hertiani, M.Si., Apt.

2017 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Malaria adalah salah satu penyakit pengancam hidup di daerah tropis yang disebakan oleh infeksi parasit dari genus Plasmodium. Munculnya strain plasmodium yang resisten terhadap obat-obat antimalaria telah banyak dilaporkan sehingga perlu upaya untuk menemukan ekstrak aktif antiplasmodium guna menjawab masalah resistensi parasit Plasmodium. Salah satu alternatif untuk mencari obat antimalaria yaitu ekstrak aktif yang terdapat pada actinomycetes dari sedimen laut. Actinomycetes diisolasi dari sedimen laut yang merupakan koleksi Pusat Penelitian Bioteknologi, LIPI dan berpotensi menghasilkan bahan aktif, kemudian diekstraksi dengan etil asetat, hingga dihasilkan ekstrak kental etil asetat. Selanjutnya dilakukan skrining dengan metode uji aktivitas antiplasmodium in vitro pada kultur Plasmodium falciparum. Kultur P. falciparum yang mengandung parasit dengan parasitemia 0,5-1% dimasukkan dalam mikrokultur 96 sumuran. larutan yang mengandung bahan uji pada berbagai konsentrasi ditambahkan pada kultur untuk selanjutnya diinkubasikan selama 72 jam. Hasil skirining 15 ekstrak actinomycetes dengan konsentrasi 10 mikrogram per mililiter diperoleh 5 ekstrak dengan persentase penghambatan tertinggi yakni ekstrak A 25,69%; ekstrak B 35,55%; ekstrak C 29,18%; ekstrak E 30,66%; dan ekstrak N 43,26%. Selanjutnya, kelima ekstrak actinomycetes dilakukan penelitian lanjutan dengan menggunakan seri konsentrasi 1,25; 2,5; 5; 10; 20; 40 mikrogram/mL dan diperoleh IC50, dimana ekstrak A (IC50=34,94 mikrogram per mililiter plus minus 20,64); ekstrak B (IC50=22,87 mikrogram per mililiter plus minus 7,73) ekstrak C (IC50=33,82 mikrogram per mililiter plus minus 11,92); E (IC50=29,88 mikrogram per mililiter plus minus 22,46); N (IC50=15,88 mikrogram per mililiter plus minus 1,91) memiliki aktivitas antimalaria kategori potensial sedang. Hasil uji sitotoksisitas pada sel vero menunjukkan bahwa ekstrak actinomycetes pada konsentrasi 62,5 dan 125 mikrogram per mililiter dapat meningkatkan viabilitas sel vero, namun pada konsentrasi 250; 500; dan 1000 mikrogram per mililiter dapat menurunkan viabiltas sel vero. Untuk penentuan indeks selektivitas diperoleh hasil bahwa ekstrak B (10,69) dan N (14,71) tergolong ekstrak antimalaria yang aktif dan aman, ekstrak C (6,93) tergolong aktif parsial sedangkan ekstrak A dan E tergolong tidak selektif sebagai antiplasmodium dengan nilai indeks selektivitas kurang dari 4. Pada uji kromatografi lapis tipis ekstrak actinomycetes mengandung golongan senyawa alkaloid, fenolik, dan terpenoid.

Malaria is a life threatening disease in tropical regions by infection of Plasmodium genus which still become a global health problem, especially in developing countries. The emergence of plasmodium strain which was resistant to antimalarial drugs has been reported, so it was needed an Attempts to find the extract of active anti-plasmodium to overcome the resistance of Plasmodium problem is required. An alternative source for new antimalarial drugs is active in the actinomycetes of marine sediment. Actinomycetes was isolated from marine sediments which was a collection of the Biotechnology Research Center, LIPI. Then, it was extracted with ethyl acetate to get the thick extract of ethyl acetate. Furthermore, screening was done by using a method of anti-plasmodium activity test in vitro on Plasmodium falciparum culture. P. falciparum cultures containing parasites with 0,5-1% parasitemia were included in microkultur 96 wells. A solution containing the test material at various concentrations was added to the culture for subsequent incubation for 72 hours. The result of skirining of 15 extracts of actinomycetes with concentration of 10 mikrogram per mililiter obtained 5 extract with highest percentage of inhibition extract A 25.69%; extract B 35.55%; extract C 29.18%; extract E 30.66%; and extract N 43.26%. Furthermore, the five extracts of actinomycetes carried out continued research using a series of concentrations of 1.25; 2.5; 5; 10; 20; 40 mikrogram per mililiter and obtained IC50, where extract A (IC50 = 34.94 mikrogram per mililiter plus minus 20.64); extract B (IC50 = 22.87 mikrogram per mililiter plus minus 7.73) extract C (IC50 = 33.82 mikrogram per mililiter plus minus 11.92); E (IC50 = 29.88 mikrogram per mililiter plus minus 22.46); N (IC50 = 15.88 mikrogram per mililiter plus minus 1.91) has medium potential antimalarial activity. The results of cytotoxicity test on vero cells showed that acinimycetes extract at 62,5 and 125 mikrogram per mililiter concentrations could increase vero cell viability, but at concentrations of 250; 500; and 1000 mikrogram per mililiter can decrease vero cell viability. For the determination of selectivity index, it was found that extract B (10.69) and N (14.71) were classified as active and safe antimalarial extract, C extract (6.93) were partially active, while extracts A and E were not selective antiplasmodium with selectivity index value less than 4. In thin layer chromatography test of actinomycetes extract contains class of alkaloid, phenolic, and terpenoid compounds.

Kata Kunci : Actinomycetes, Sedimen Laut, Antiplasmodium, Plasmodium falciparum, Sitotoksisitas.