Diagnosis Molekuler Strongyloides stercoralis dengan Polymerase Chain Reaction (PCR) pada Sampel Feses dari Community Based Study (CBS) Maluku Tengah

HANDRIANI KRISTANTI , dr. E. Elsa Herdiana Murhandarwati, M. Kes., Ph. D ; Dr. dr. Mahardika AW, DTM & H., M. Kes

2017 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Tropis

INTISARI Latar belakang : Strongyloidiasis adalah penyakit parasit yang disebabkan oleh cacing gelang Strongyloides stercoralis. Berdasarkan data World Health Organization (WHO, 2005) perkiraan jumlah penduduk di dunia yang terinfeksi Strongyloides stercoralis berkisar antara 3 - 100 juta orang. Infeksi Strongyloidiasis tersebar pada daerah dengan iklim tropik dan subtropik yang panas, mempunyai kelembaban tinggi dan sanitasi yang kurang baik. Manifestasi yang ditimbulkan Strongyloides stercoralis biasanya lebih ringan dibandingkan dengan cacing nematoda yang lain, bahkan tidak menimbulkan gejala. Pada infeksi ringan ditemukan gejala seperti mual, muntah, diare dan konstipasi. Pada infeksi yang berat dan kronik bisa menimbulkan anemia, disentri menahun, hingga kematian yang disebabkan oleh infeksi sekunder pada lesi usus. Pemeriksaan mikroskopis dilakukan dengan metode Baermann dan Koga Agar Plate (KAP). Tujuan : Untuk mengetahui kemampuan PCR untuk diagnosis Strongyloides stercoralis pada sampel feses awetan menggunakan ethanol 96% dari penduduk di wilayah Tulehu, Maluku Tengah Metode : Penelitian ini merupakan penelitian desktiptif cross sectional. Pemeriksaan molekuler untuk deteksi Strongyloides stercoralis dilakukan dengan metode PCR menggunakan primer forward (SSF : 5' ATC GTG TCG GTG GAT CAT TC 3') dan primer reverse (SSR : 5' CTA TTA GCG CCA TTT GCA TTC 3') dengan target DNA yaitu ITS2 pada band 114 bp. Sampel yang digunakan merupakan sampel feses awetan dengan larutan etanol 96% dari Maluku Tengah yang sebelumnya telah diperiksa secara mikroskopis dengan metode Baermann dan KAP. Hasil : Berdasarkan pemeriksaan secara molekuler dengan metode PCR menunjukkan 45 dari 80 sampel dinyatakan positif terinfeksi oleh cacing Strongyloides stercoralis ditandai dengan adanya band yang muncul pada band target 114 bp. Dua puluh sampel yang dinyatakan negatif pada metode baermann dan KAP terdapat 8 sampel dinyatakan positif dengan metode PCR. Kesimpulan : Hasil pemeriksaan molekuler dengan metode PCR terdapat 45 dari 80 sampel dinyatakan positif strongyloidiasis (56,25%). Sampel negatif yang berjumlah 20 dengan metode Baermann dan KAP, terdapat 8 sampel (40%) dinyatakan positif dengan metode PCR. Hal tersebut menunjukkan bahwa metode PCR mampu meningkatkan kemampuan deteksi Strongyloides stercoralis pada sampel yang telah diawetkan. Kata Kunci : Strongyloides stercoralis, Baermann, KAP, PCR, ITS2

ABSTRACT Background : Strongyloidiasis is a parasitic disease caused by the Strongyloides stercoralis worms. Based on data from the World Health Organization (WHO, 2005) showed that the estimated population of the world infected with Strongyloides stercoralis ranges from 3 to 100 million people. The spread of Strongyloidiasis infection in areas with tropical and subtropical climates that heat, have high humidity and poor sanitation. The manifestations of Strongyloides stercoralis were lighter than other nematode worms. In mild infections there were symptoms such as nausea, vomiting, diarrhea and constipation. In severe and chronic infections caused anemia, chronic dysentery, until death because secondary infection in the intestinal lesion. Microscopic examination was done by the method of Baermann and Koga Agar Plate (KAP). Objective : To determine the ability of PCR for the diagnosis of Strongyloides stercoralis in preserved stool samples using 96% ethanol from population in the Tulehu region of Central Maluku. Methods : This research was a cross sectional descriptive study aiming to know the result of molecular examination by PCR method using forward primer (SSF: 5 'ATC GTG TGG GTG GAT CAT TC 3') and reverse primer (SSR: 5 'CTA TTA GCG CCA TTT GCA TTC 3 ') with the target DNA of ITS2 at 114 bp. The samples used were preserved stool samples with 96% ethanol solution from Central Maluku which had been examined microscopically by Baermann and KAP methods. Results : The results of examination by PCR method showed 45 samples positively infected by the Strongyloides stercoralis worms characterized by the presence of bands that appeared on the target band of 114 bp. Twenty samples expressed negative on baermann and KAP methods, there were 8 samples tested positive by PCR method. Conclusion : Results of molecular examination by PCR method there were 45 of 80 samples tested positive strongyloidiasis (56,25%). Twenty negative samples with Baermann and KAP methods, 8 samples (60%) were tested positive by PCR method. This result showed that the PCR method enhances the detection ability of Strongyloides stercoralis in preserved samples. Keywords : Kata Kunci : Strongyloides stercoralis, Baermann, KAP, PCR, ITS2

Kata Kunci : Strongyloides stercoralis, Baermann, KAP, PCR, ITS2