Kajian Antifertilitas Ekstrak Biji Kedelai (Glycine max (L.) Merr.) Pada Tikus Jantan (Rattus norvegicus L.): Analisis Ekspresi Aromatase Dan Kadar Estradiol

RETNO ARYANI, Prof. Dr. drh. Pudji Astuti, MP;Prof. Sukarti Moeljopawiro, M.App.Sc., Ph.D.;Prof. Dr. L. Hartanto Nugroho, M. Agr.

2017 | Disertasi | S3 Ilmu Biologi

Pemanfaatan tumbuhan ataupun ekstrak tumbuhan sebagai agen penurun kapasitas reproduksi di masyarakat merupakan salah satu cara pengendalian pertambahan penduduk. Salah satu jenis tumbuhan yang berpotensi sebagai agen penurun fertilitas adalah kacang kedelai (Glycine max (L.) Merr.) karena kaya kandungan fitoestrogen terutama genistein. Tujuan penelitian ini untuk mengkaji pengaruh ekstrak metanol biji kedelai varietas grobogan terhadap organ dan hormon reproduksi tikus (Rattus norvegicus L.) jantan. Kandungan genistein pada ekstrak metanol biji kedelai diukur dengan metode KLT (Kromatografi Lapis Tipis) dan HPLC (High Performance Liquid Chromatography). Tikus albino Wistar (Rattus norvegicus L.) jantan dewasa sebanyak 40 ekor dengan berat 120-130g, dibagi menjadi 4 kelompok. Kelompok I sebagai kontrol, kelompok II dan III diberi ekstrak metanol biji kedelai masing-masing 250 dan 500 mg/kgBB, untuk kelompok IV diberi genistein 0,3 mg/kg BB. Pemberian per oral selama 52 hari. Parameter yang diukur ialah hormon testosteron dan estradiol-17β serum darah dan testis dengan metode ELISA, enzim aromatase dideteksi dengan metode Western Blot dan imunohistokimia. Untuk pembuatan preparat histologis dengan metode paraffin dan pewarnaan HE, sedangkan lipid peroksida dengan MDA. Pada analisis HPLC didapatkan hasil bahwa dalam 1 gram sampel ekstrak metanol biji kedelai varietas grobogan mengandung 0,6356 mg genistein. Pada hari ke 52 perlakuan ekstrak biji kedelai menyebabkan penurunan terhadap berat testis (kontrol 2,54±0,03g, perlakuan ekstrak 500 mg/kgBB 2,40±0,01g), penurunan kadar testosteron serum (kontrol 3,23±0,84ng/ml, perlakuan ekstrak 500 mg/kgBB 1,40±0,54ng/ml), estradiol serum (kontrol 47,42±0,98pg/ml, perlakuan ekstrak 500 mg/kgBB 44,97±0,65pg/ml) dan estradiol testis (kontrol 54,00±2,08pg/ml, perlakuan ekstrak 500 mg/kgBB 47,32±1,49 pg/ml). Hasil analisis Western blot dan imunohistokimia menunjukkan bahwa ekstrak metanol biji kedelai varietas grobogan menurunkan ekspresi aromatase pada testis tikus. Ekstrak metanol biji kedelai varietas grobogan menyebabkan perubahan histopatologis testis dan meningkatkan lipid peroksida epididimis. Simpulan penelitian ini adalah ekstrak metanol biji kedelai varietas grobogan dapat menurunkan fertilitas tikus jantan dengan menghambat spermatogenesis dan steroidogenesis yaitu antara lain menyebabkan penurunan berat testis, kadar testosteron serum, estradiol-17β serum dan testis, menurunnya proses spermatogenesis dan ekspresi enzim aromatase pada testis.

Utilization of plants or plant extracts as agents of lowering reproductive capacity in the community is one way to control population growth. One type of plants that has potential as fertility-lowering agent is soybean seed (Glycine max (L.) Merr.) a plant rich in phytoestrogens especially genistein. The objective of this study to assess the effect of soybean seed methanol extract on organ and reproductive hormone of male rat (Rattus norvegicus L.). The content of genistein was measured by the method of TLC (Thin Layer Chromatography) and HPLC (High Performance Liquid Chromatography). Fourty males Wistar rats (Rattus norvegicus L.) weight 120-130 g were divided into 4 groups of 10. The first groups as a control, the second to fourth groups were given soybean extract as much as 250mg, 500mg, and genistein 0.3 mg/kg of body weight respectively for 52 days. The parameter measured was testosterone and estradiol-17β blood serum and testicular by ELISA, aromatase enzyme was detected by Western blot and immunohistochemistry method. Histological preparations was made by paraffin method and HE staining, while the epididymis lipid peroxide by MDA. The HPLC analysis showed that in 1 gram sample Grobogan varieties of soy extract containing 0.6356 mg of genistein. On day 52 treatment of soybean seed extract caused a significant decline in testicular weight (control 2.54±0.03g, treatment of extract 500 mg/kgbw 2.40±0.01g), a decrease in serum testosterone levels (control 3.23±0.84ng/ml, treatment of extract 500 mg/kgbw 1.40±0.54ng/ml), serum estradiol (control 47.42±0.98pg/ml, treatment of extract 500 mg/kgbw 44.97±0.65pg/ml) and estradiol testis (control 54.00±2.08pg/ml, treatment of extract 500 mg/kgbw 47.32±1.49 pg/ml). The results of Western blot and immunohistochemical analysis showed that the soybean methanol extract decreased the expression of aromatase in rat testis. Soybean methanol extract caused histopathological changes in the testis and increased the lipid peroxide epididymis. The conclusions of this research were soybean seed extract can decrease the fertility of male rats by inhibiting spermatogenesis and steroidogenesis that were cause a decrease in testis weight, levels of serum testosterone, estradiol-17β serum and testis, spermatogenesis process and aromatase expression in testis.

Kata Kunci : biji kedelai, tikus jantan, testis, estradiol-17β, aromatase/soybean seed, male rat, testes, Estradiol-17β, aromatase