VALIDASI METODE ANALISIS TETRASIKLIN DENGAN MODIFIKASI PREPARASI 3 TAHAPAN PADA DAGING IKAN NILA (Oreochromis niloticus) MENGGUNAKAN ALAT KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

RUTH ELOK CYNTIARA, Dr. drh. R. Gagak Donny Satria, M.P., M.Pd.

2017 | Skripsi | S1 KEDOKTERAN HEWAN

Ikan merupakan bahan pangan yang mulai digemari masyarakat. Peningkatan jumlah konsumsi ikan diikuti dengan peningkatan produksi perikanan. Upaya peningkatan produksi menyebabkan penggunaan antibiotik juga semakin meningkat. Antibiotik yang digunakan dalam industri perikanan salah satunya adalah tetrasiklin. Penggunaan tetrasiklin secara terus menerus dalam jangka waktu yang lama dapat menyebabkan residu pada hewan. Metode deteksi residu tetrasiklin pada daging ikan salah satunya dengan menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Penelitian ini bertujuan untuk melakukan validasi metode analisis tetrasiklin pada daging ikan yang didasarkan atas spesifisitas, presisi, akurasi, linearitas, batas deteksi, dan batas kuantifikasi dengan alat KCKT Shimadzu 6.1. Fase gerak campuran dari metanol : asetonitril : asam oksalat (5:15:80), fase diam berupa kolom pendek C18 150 L x 4,6 mm dengan suhu 30°Celsius. Kecepatan laju alir fase gerak 1 ml/menit dan panjang gelombang 355 nm. Hasil penelitian menunjukkan area puncak tetrasiklin muncul pada retensi waktu antara menit ke-3,5 sampai ke-4,3. Persamaan garis linear y = 1614,8x-540,47 dengan nilai r = 0,990. Presisi ditunjukkan dengan nilai relative standard deviation (RSD) ≤ 2%. Akurasi diperoleh hasil 97,6% sampai 102,6%. Hasil batas deteksi analisis sampel pada konsentrasi 0,086 µg/ml dan batas kuantifikasi analisis sampel pada konsentrasi 1,627 µg/ml. Dari hasil pengujian validasi tersebut dapat disimpulkan bahwa metode yang dikembangkan memiliki validitas yang cukup baik.

Fish is commonly used as food nowadays. Increasing the amount of fish consumption is followed by increasing of fishery production. The increasing demands of fish equals to the use of antibiotics in order to manage the quality of the fish. One of the antibiotics used in the fishing industry is tetracycline. Continuous use of tetracycline over long periods of time can cause residues in animals. One way to detect tetracycline residues in fish meat is to use high performance liquid chromatography (HPLC) methods. This study aims to validate the method of tetracycline analysis on fish meat based on specificity, precision, accuracy, linearity, detection limit, and quantification limit with KCKT Shimadzu 6.1. The mobile phase made of methanol: acetonitrile: oxalic acid (5:15:80), using colomn of C18 150 L x 4.6 mm with a temperature of 30°Celsius. Velocity of flow rate of mobile phase 1 ml / min, and wavelength of 355 nm. The results showed that the peak area of tetracycline appeared at retention time between minutes 3.5 to 4.3. Linear line equation y = 1614,8x-540,47 with value r = 0,990. Precision was shown by the relative standard deviation (RSD) ≤ 2%. Accuracy obtained results 97.6% to 102.6%. The results of the detection limit of the analysis of the samples was at a concentration of 0.086 μg / ml and limit quantification of the sample analysis was at a concentration of 1.627 μg / ml. The method possessed good validity based on linearity, specificity, precision, accuracy, but did not require the limit of detection and limit of quantification.

Kata Kunci : tetracycline, fish, HPLC, validation