SITOTOKSISITAS EKSTRAK SEL JERUK PURUT (Citrus hystrix DC.) PASCA ELISITASI Saccharomyces cereviseae H. TERHADAP SEL T47D

DWI PRIYANTO, Woro Anindito Sri Tunjung, S.Si., M.Sc., Ph.D.; Dr. rer.nat. Ari Indrianto, S.U.

2017 | Tesis | S2 Biologi

Jeruk purut merupakan herbal yang banyak dipakai sebagai bahan obat tradisional di Indonesia. Ekstrak daun jeruk purut mempunyai potensi sebagai obat kanker dengan efek sitotoksisitas pada sel kanker serviks, neuroblastoma dan sel kanker payudara. Komposisi senyawa bioaktif pada ekstrak daun jeruk purut mampu meningkatkan persentase apoptosis sel kanker payudara. Teknik kultur jaringan digunakan untuk membuat kondisi yang lebih seragam dan terkontrol terhadap sel tanaman sehingga menghasilkan metabolit sekunder dengan komposisi yang lebih stabil. Penelitian ini bertujuan menerapkan metode elisitasi suspensi sel Citrus hystrix DC. menggunakan Saccharomyces cereviseae H. Kalus biji jeruk purut digunakan untuk inisiasi kultur suspensi. Suspensi sel pada awal fase stasioner diberi perlakuan elisitor Saccharomyces cereviseae H. konsentrasi 1 dan 10 mg/ml kemudian dipanen pada hari ke-2 dan ke-4. Suspensi sel hasil perlakuan diekstrak menggunakan pelarut etil asetat. Kandungan senyawa bioaktif dalam ekstrak diuji dengan GC-MS, sedangkan potensi antikanker diuji menggunakan metode MTT. Suspensi sel jeruk purut (Citrus hystrix DC.) tanpa perlakuan menghasilkan senyawa bioaktif 1,8-cineole, alpha-caryophyllene dan beta-caryophyllene. Senyawa bioaktif yang diproduksi oleh suspensi sel jeruk purut pasca elisitasi Saccharomyces cereviseae H. adalah germacrene A, alpha-pinene, beta-selinene, eicosamethylcyclodecasiloxane, hexadecamethylheptasiloxane, silicate anion tetramer, patchouli alkohol, alpha-selinene, beta-ocimene, benzene, cadinene dan globulol. Ekstrak suspensi sel jeruk purut dengan konsentrasi elisitor 10 mg/ml dengan waktu pemanenan hari ke-4 mempunyai nilai IC50 sebesar 59,82 µg/ml, sedangkan ekstrak hasil perlakuan konsentrasi 10 mg/ml dengan waktu pemanenan hari ke-2 mempunyai nilai IC50 sebesar 729,64 µg/ml. Ekstrak suspensi sel jeruk purut dengan konsentrasi elisitor 1 mg/ml tidak dapat ditentukan nilai IC50-nya, baik pada waktu pemanenan hari ke-2 maupun hari ke-4. Nilai IC50 kedua ekstrak ini diduga diatas 1000 µg/ml.

Kaffir lime widely used as a traditional medicine in Indonesia. The leaves extract of kaffir lime has an anticancer potency with cytotoxicity effect on cervical cancer cells, neuroblastoma and breast cancer cells. The composition of bioactive compounds in the extract can increase the percentage of breast cancer cell apoptosis. Tissue culture techniques was used to control plant cells environment in order to stimulate the cells produced secondary metabolites. The study applied the method of elicitation on Citrus hystrix DC. cell suspension using Saccharomyces cereviseae H. The callus was induced from the seed explant, then transferred into liquid medium to initiate suspension culture. The culture was treated by the elicitor Saccharomyces cereviseae H. concentrations of 1 and 10 mg/ml and harvested on the 2nd and 4th days. The elicited cell was extracted by ethyl acetate solvent. The content of bioactive compounds in the extract was detected by GC-MS and anticancer potency is tested using MTT method. Kaffir lime cells suspension without elicitation produced 1,8-cineole, alpha-caryophyllene and beta-caryophyllene. While post elicitation on cells suspension extract produced germacrene A, alpha-pinene, beta-selinene, eicosamethylcyclodecasiloxane, hexadecamethylheptasiloxane, silicate anion tetramer, patchouli alkohol, alpha-selinene, beta-ocimene, benzene, cadinene dan globulol. The extracts treated by elicitor concentration of 10 mg/ml with harvesting time on day 4th after treatment had IC50 value of 59,82 µg/ml, while extract of elisitor concentration of 10 mg/ml with time of harvesting on day 2nd has IC50 value of 729,64 µg/ml. The extract of cell suspension with elicitor concentration of 1 mg/ml can not be determined its toxicity value, both at harvest time of day 2nd and day 4th. The IC50 value of both extracts be estimated more than 1000 µg/ml.

Kata Kunci : Citrus hystrix DC., Saccharomyces cereviseae H., elisitasi, sitotoksisitas.