VALIDASI METODE ANALISIS RESIDU TETRASIKLIN DENGAN ALAT KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT) PADA PRODUK PERIKANAN

SRI WIDOWATI ANJARSARI, Dr. drh. R. Gagak Donny Satria

2017 | Skripsi | S1 KEDOKTERAN HEWAN

Tetrasiklin merupakan golongan antibiotik yang banyak digunakan pada industri hewan ternak termasuk perikanan. Penggunaan tetrasiklin yang tidak sesuai dengan dosis yang ditetapkan dapat menimbulkan akumulasi residu pada hewan ternak dan lingkungan sehingga berbahaya bagi kesehatan manusia. Dampak negatif yang muncul diantaranya adalah munculnya reaksi alergi dan sifat resistensi pada mikroorganisme sehingga terjadi kegagalan terapi pada suatu infeksi. Salah satu cara untuk mendeteksi residu tetrasiklin pada produk ternak adalah dengan menggunakan metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Penelitian ini bertujuan untuk melakukan validasi metode analisis tetrasiklin menggunakan alat KCKT Shimadzu 6.1 dengan sistem kontrol SCL-10 A VP dan degasser DGU-14 A. Fase gerak dibuat dari campuran asetonitril, asam oksalat dalam akuabides sterile proinjection, dan metanol dengan fraksi 15:80:5. Pompa yang digunakan adalah pompa LC-10AD VP dengan kecepatan laju alir 1 ml/menit. Detektor yang digunakan adalah detektor UV-Vis SPD 10 AV VP dengan panjang gelombang 355 nm dan kolom C18 ukuran 150 L x 4.6 mm pada suhu 40o Celcius. Validasi dilakukan dengan menggunakan parameter yang meliputi spesifisitas, presisi, linearitas, akurasi, batas deteksi, dan batas kuantifikasi. Hasil penelitian menunjukkan rerata luas area untuk konsentrasi tetrasiklin 1 mikrogram/ml; 1,25 mikrogram/ml; 1,5 mikrogram/ml; 1,75 mikrogram/ml; 2 mikrogram/ml; dan 2,25 mikrogram/ml berturut-turut adalah 24.899,6667; 27.814,3333; 31.054,6667; 38.992; 43.297,0000; dan 47.425,6667 dengan waktu retensi antara menit ke-3,5 hingga menit ke-4,5. Keterulangan dilakukan sebanyak tiga kali dengan rata-rata nilai RSD kurang dari sama dengan 2%. Batas deteksi analisis sampel diperoleh pada konsentrasi 0,348 mikrogram/ml dan batas kuantifikasi analisis sampel pada konsentrasi 1,1602 mikrogram/ml sehingga belum memenuhi batas maksimum residu yang setara dengan 0,01 mg/kg pada sampel. Persamaan garis linear yang diperoleh y = 19087x + 4563,4 dengan nilai r = 0,990. Kesimpulan dari hasil pengujian validasi tersebut adalah bahwa metode yang dikembangkan memiliki validitas yang cukup baik.

Tetracycline is an antibiotic widely used in livestocks including fishery industries. The use of tetracycline which do not comply with the rules can lead to the accumulation of its residues. The consequences due to the consumption of products containing high residue of antibiotic are fatal such as resistance in certain microbes that leads to therapy failure and allergic reactions in human. High performance liquid chromatography (HPLC) can be used to detect residues of tetracycline in livestock products. This study was to perform validated possess of tetracycline analysis using a Shimadzu 6.1 HPLC with the control system SCL-10 A VP and DGU-14 A degasser. The mobile phase used was mixed of acetonitrile, oxalic acid diluted in sterile aquabidest proinjection, and methanol solvent (15:80:5). The pump used was LC-10AD VP pump with flow rate of 1 ml/min. The detector used was UV-Vis SPD 10 AV VP with a wavelength of 355 nm, and the column used was C18 at size of 150 L x 4.6 mm set at temperature of 40o Celcius. The validation test was done based on the specificity, precision, linearity, accuracy, limit of detection (LOD), and limit of quantification (LOQ). The results showed that the average of area concentration at 1 microgram/ml; 1,25 microgramg/ml; 1,5 microgram/ml; 1,75 microgram/ml; 2 microgram/ml; and 2,25 microgram/ml respectively were 24899.6667; 27814.3333; 31054.6667; 38992; 43297.0000; and 47425.6667 with a retention time in between minute 3,5 and minute 4,5. Repeatability test was done three times and the average value of RSD mean obtained was less than or equal with 2%. The LOD was at concentration of 0,348 microgram/ml and the LOQ was at concentration of 1,1602 microgram/ml. The LOD and LOQ result did not accomplish the target which was equal to 0,01 microgram/ml in the samples used. The equation of linear line obatained was y = 19087x + 4563.4; with r = 0,990. It can be concluded that the method developed in the research possessed good enough validity.

Kata Kunci : Tetrasiklin, KCKT, validasi, tetracycline, HPLC, validation