PENGARUH SUMBER EKSPLAN DAN WAKTU INKUBASI TERHADAP HASIL ISOLASI PROTOPLAS ANGGREK Phalaenopsis Polar Bear

FARIDAH NURAINI, Dr. rer.nat. Ari Indrianto, S.U.

2017 | Skripsi | S1 BIOLOGI

Phalaenopsis termasuk dalam genus anggrek terbesar dari famili Orchidaceae. Namun seiring dengan permintaan anggrek yang cukup tinggi di Indonesia, hal tersebut tidak diikuti dengan pemuliaan dan pengembangan anggrek yang optimal. Persilangan seksual dalam pemuliaan tanaman anggrek masih sering dijumpai keterbatasan. Dengan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi yang berkembang pesat saat ini, maka bioteknologi modern menjadi solusi alternatif dalam mengatasi keterbatasan yang ditemui pada persilangan seksual yaitu melalui teknik hibridisasi somatik atau fusi protoplas. Isolasi dan purifikasi protoplas merupakan protokol spesifik untuk setiap jenis tanaman dan penting untuk dikuasai agar menghasilkan protoplas dengan kerapatan tinggi dan viabel. Sampai saat ini, sangat sedikit studi penelitian yang melaporkan tentang protoplas pada anggrek, terutama anggrek Phalaenopsis hybrid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh sumber eksplan dan waktu inkubasi terhadap hasil isolasi protoplas Phalaenopsis Polar Bear. Percobaan faktorial terdiri dari dua faktor yang diatur oleh rancangan acak lengkap (RAL) dengan tiga ulangan. Faktor pertama adalah sumber eksplan yang terdiri dari empat tingkatan yaitu daun aklimatisasi, daun in vitro, akar aklimatisasi dan akar in vitro. Faktor kedua adalah waktu inkubasi yang terdiri dari dua tingkat yaitu 9 jam dan 18 jam. Data dianalisis dengan menggunakan uji ANOVA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ada pengaruh perlakuan untuk semua variabel yang diamati. Waktu inkubasi yang paling tepat untuk isolasi protoplas anggrek Phalaenopsis Polar Bear dalam menghasilkan densitas protoplas yang tertinggi adalah 18 jam dan untuk viabilitas protoplas yang tertinggi adalah 18 jam untuk sumber eksplan aklimatisasi serta 9 jam untuk sumber ekplan in vitro. Sumber eksplan anggrek Phalaenopsis Polar Bear yang paling baik dalam mengasilkan densitas protoplas adalah daun aklimatisasi sebesar 5,31 x 104 protoplas/mL dan viabilitas protoplas yang tertinggi adalah daun aklimatisasi sebesar 1,36 x 104 protoplas/mL.

Phalaenopsis is the one of the largest orchid genera from the family of Orchidaceae. The high demand for orchids in Indonesia, is not followed by the optimalof breeding and development orchids. Sexual crosses in breeding orchids is still frequently encountered limitations. With the rapid development of science and technology at present, modern biotechnology as an alternative solution to overcome the limitations encountered on sexual crossing is through somatic hybridization techniques or protoplast fusion. Isolation and purification of protoplasts are specific protocols for each kind of plant and important to master in order to generate protoplasts with high density and viable. Until now, very few studies reporting on protoplast in orchids, especially Phalaenopsis hybrid. This study aimed to determine the effect of explant source and incubation time against the isolated protoplasts Phalaenopsis Polar Bear. Factorial experiment consisted of two factors which were governed by a completely randomized design (CRD) with three replications. The first factor was a source of explants that consists of four levels, namely acclimatization leaves,in vitro leaves, acclimatization root and in vitro root. The second factor was the incubation time consisting of two levels, namely 9 hours and 18 hours. Data were analyzed using ANOVA test. The results showed that treatment effected all variables observed. The incubation time was most appropriate for the isolation of protoplasts Phalaenopsis Polar Bear in producing the highest density of protoplasts was 18 hours and for the viability of protoplasts highest was 18 hours for the source of explants acclimatization and 9 hours for the source of explants in vitro. The best explant source of Phalaenopsis Polar Bear leads to the density of protoplasts was acclimatization leaves which have 5.31 x 104 protoplasts/mL and viability protoplasts of acclimatization leaves was 1.36 x 104 protoplasts/mL.

Kata Kunci : anggrek Phalaenopsis, protoplas, isolasi protoplas/Phalaenopsis orchid, protoplast, protoplast isolation