Identifikasi Spesies Babi Pada Kerupuk Rambak di Wilayah Malang Menggunakan Teknik Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism

SATRIA HENDRAWAN , Yuny Erwanto, S.Pt., M.P., Ph.D

2017 | Skripsi | S1 ILMU DAN INDUSTRI PETERNAKAN

Kerupuk rambak merupakan salah satu pangan olahan yang sangat digemari masyarakat karena memiliki rasa yang khas. Kerupuk rambak dapat dibuat dari kulit berbagai spesies hewan ternak seperti sapi, kerbau, kambing, domba maupun kulit babi. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan spesies jenis kulit ternak yang digunakan sebagai bahan baku pembuatan kerupuk rambak. Sampel yang digunakan merupakan kerupuk rambak konvensional yang dibeli di wilayah Malang dengan merk yang berbeda. Penelitian dilakukan melalui beberapa tahap yaitu preparasi sampel, isolasi DNA, Polymerase Chain Reaction (PCR) dan analisis Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) menggunakan enzim restriksi BseDI. Variabel yang diamati berupa hasil visualisasi pita DNA yang terbentuk dari proses isolasi DNA, PCR dan digesti amplikon DNA serta tingkat konsentrasi dan kemurnian DNA. Hasil isolasi DNA dari sampel menunjukkan bahwa semua DNA sampel kerupuk rambak dapat terisolasi. Amplifikasi isolat DNA dengan PCR menggunakan primer gen mitokondria cytochrome b, menunjukkan bahwa 13 sampel termasuk kontrol berhasil teramplifikasi di 359 bp. Teknik RFLP dilakukan untuk mendeteksi adanya spesies babi atau tidak dari sampel kerupuk rambak. Aplikasi teknik RFLP pada 11 sampel yang dilanjutkan pada tahap restriksi menunjukkan 1 sampel terdeteksi kandungan spesies babi dengan terbentuknya fragmen sebesar 359 bp, 228 bp dan 131 bp sementara 10 sampel lain terdeteksi sebagai kerupuk rambak yang terbuat dari bahan baku kulit sapi dengan terbentuknya fragmen sebesar 359 bp saja. Teknik Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) merupakan teknik yang efektif untuk mendeteksi adanya kandungan atau spesies babi atau tidak dalam suatu pangan olahan meski telah diolah dengan berbagai perlakuan dalam proses pemasakan.

Rambak Crackers is one of the popular processed food because it has a distinctive taste. Rambak crackers can be made from the skins of various species of animals such as cattle, buffaloe, goat, sheep and pig. This research aims to determine the species based on skin type of animals that used as raw material for making rambak crackers. The samples were conventional rambak crackers purchased in Malang with different brands. This research was done by several stages such as sample preparation, DNA isolation, Polymerase Chain Reaction (PCR) and analysis of Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) using BseDI restriction enzyme. The variables that measured are DNA band from DNA isolation, PCR process and digestion of DNA amplicon as well as the level of concentration and purity of DNA. DNA isolate from samples showed that all the DNA samples can be extracted. Amplification of isolate DNA by PCR using the mitochondrial cytochrome b gene, showed that 13 samples including controls successfully amplified at 359 bp. RFLP techniques done to detect the presence of pig species use BseDI restriction enzyme. Application of RFLP in 11 samples showed that a sample detected as pig species with the formation of a fragment 359 bp, 228 bp and 131 bp while 10 other samples detected made from cattle hide with the formation of fragments 359 bp only. Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) techniques was an effective methode for detecting the presence or the content of the pig species eventough in a processed food has been treated with a variety of treatments in the cooking process.

Kata Kunci : Kerupuk Rambak, Isolasi DNA, Polymerase Chain Reaction (PCR), Enzim Restriksi, Kulit Babi.