PERBEDAAN EKSPRESI GEN HES-1 DAN CEBPA PADA PASIEN CHRONIC MYELOID LEUKEMIA (CML) FASE KRONIK DAN FASE LANJUT (AKSELERASI DAN BLAST CRISIS)

SELVI RAHMAWATI, Dewi Kartikawati Paramita, S.Si., M.Si., Ph.D.; dr. Susanna Hilda Hutajulu, Sp. PD. K.HOM., Ph.D

2016 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Dasar dan Biomedis

Pendahuluan. Chronic myeloid leukemia (CML) merupakan penyakit keganasan hematologi pada sel stem hematopoietik yang disebabkan karena terbentuknya gen fusi BCR-ABL. BCR-ABL meningkatkan aktivitas tirosin kinase sehingga menginduksi peningkatan proliferasi. Hal tersebut menyebabkan terbentuknya fase kronik yang merupakan fase awal pada kasus CML. Kegagalan terapi dapat menyebabkan berkembangnya CML fase kronik menjadi fase lanjut (akselerasi dan blast crisis). Mekanisme perkembangan tersebut masih belum diketahui secara pasti, namun terhambatnya proses diferensiasi myeloid dan mutasi genetik lain diduga merupakan penyebab transisi fase kronik menjadi blast crisis. Overekspresi Hes-1 diduga dapat menghambat ekspresi CEBPA yang merupakan gen regulator untuk proses diferensiasi myeloid, sehingga menyebabkan diferensiasi terhambat. Meskipun demikian, keterkaitan kedua gen tersebut terhadap perkembangan CML belum dibuktikan pada sampel pasien. Tujuan. Mengkaji ekspresi Hes-1 dan CEBPA pada pasien CML fase kronik dan fase lanjut. Metode. Penelitian ini dilakukan pada 61 sampel RNA dari pasien CML fase kronik dan 17 sampel RNA dari pasien CML fase lanjut (akselerasi dan blast crisis). Ekspresi Hes-1 dan CEBPA diukur menggunakan qRT-PCR dengan GAPDH sebagai kontrol internal. Unpaired t-test dilakukan untuk mengetahui beda nyata ekspresi CEBPA antara kedua kelompok dan Mann Whitney test dilakukan untuk mengetahui beda nyata ekspresi Hes-1 antara kedua kelompok. Hasil. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekspresi Hes-1 lebih tinggi secara signifikan (p value=0,0) pada fase kronik (rerata+-SD = 97,8+-236,6) dibandingkan fase lanjut (rerata+-SD = 8,5+-30,7). Ekspresi CEBPA lebih tinggi pada fase kronik (rerata+-SD = 5,2+-16,0) dibandingkan fase lanjut (rerata+-SD = 1,7+-2,4), namun perbedaan tersebut tidak signifikan secara statistik (p value=0,1). Ekspresi Hes-1 meningkat pada 70,5% sampel pasien fase kronik dan pada 17,6% sampel pasien fase lanjut, sedangkan ekspresi CEBPA menurun pada 42,6% sampel pasien fase kronik dan pada 47,1% sampel pasien fase lanjut. Standar deviasi yang tinggi terutama pada hasil pengukuran ekspresi Hes-1 pada fase kronik menunjukkan adanya variasi individu pada sampel yang digunakan. Selain itu, faktor genetik lain diduga mempengaruhi hasil yang diperoleh pada penelitian ini. Kesimpulan. Ekspresi Hes-1 pada CML fase lanjut lebih rendah dibandingkan fase kronik, sedangkan ekspresi CEBPA tidak berbeda antara CML fase kronik dengan fase lanjut.

Introduction: Chronic Myeloid Leukemia (CML) is a myeloproliferative disorder of hematopoietic stem cell, characterized by Philadelphia chromosome containing BCRABL fusion gene. BCR-ABL cause a constitutive tyrosine kinase activity result in myeloid proliferation. It leads to form an early phase of CML called chronic phase. Unsuccessful treatment will lead to the progression of the disease into late phase (accelerated and blast crisis phase). The mechanisms involving disease progression are still poorly understood. It is assumed that due to the additional genetic event that involves in differentiation blocking of myeloid progenitor cells, such as Hes-1 overexpression and CEBPA downregulation. Overexpression of Hes-1 is also assumed to cause an inhibition of CEBPA expression, which has a regulatory function for myeloid differentiation. However, study on these genes expression related with CML development in patients samples is still limited. Objective: To measure Hes-1 and CEBPA expression in chronic and late phase of CML patients. Methods: The expression of Hes-1 and CEBPA were measured in patients sample with Ph+ CML both in chronic phase (n=61) and late phase (n=17) using qRT-PCR with GAPDH as internal control. The difference between two groups was analyzed using unpaired t-test for CEBPA expression and Mann Whitney test for Hes-1 expression Results: Results showed that Hes-1 expression was statistically higher (p value=0,0) in the chronic phase (mean+-SD = 97,8+-236,6) compared to those in the late phase (mean+-SD = 8,5+-30,7). In addition, even though CEBPA expression in chronic and late phase were not statistically different (p value=0,1), those in the chronic phase (mean+-SD = 5,2+-16,0) were generally higher compared to those in the late phase (mean+-SD = 1,7+-2,4). Hes-1 expression was upregulated in 70,5% of chronic phase patients and in 17,6% of late phase patients, whereas CEBPA expression was downregulated in 42,6% of chronic phase patients and in 47,1% in late phase patients. High standard deviation, particularly in Hes-1 expression in the chronic phase, indicated that there was an individual variations in the sample. In addition, other genetic factors may influenced results of this study. Conclusion: Hes-1 expression was lower in late phase than those in chronic phase of CML, whereas CEBPA expression did not differ between chronic phase and late phase of CML.

Kata Kunci : Hes-1, CEBPA, fase kronik, fase lanjut, chronic myeloid leukemia,chronic phase, late phase, chronic myeloid leukemia