UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTI PENUAAN DINI RUMPUT LAUT COKLAT (Padina australis Hauck)

ARIFIN DIRMAN, Dr. Arief Nurrochmad, M.Si., M.Sc., Apt.; Dr. RR. Endang Lukitaningsih, M.Si., Apt.

2016 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Penuaan kulit dapat disebabkan oleh faktor intrinsik yang merupakan proses penuaan yang berlangsung secara alami dan faktor ekstrinsik disebabkan oleh pengaruh lingkungan seperti sinar matahari, udara, zat kimia dan lingkungan sekitar. Paparan sinar matahari terutama radiasi UV B dapat menghasilkan radikal bebas dan Reactive Oxygen Spesies (ROS). Pembentukan ROS yang melebihi kemampuan sistem pertahanan antioksidan pada sel target dapat memicu stres oksidatif serta dapat merusak biomolekul secara oksidatif seperti DNA dan membran lipid, sehingga memicu melanogenesis. Fukosantin dari rumput laut coklat telah dilaporkan menekan ekspresi Messenger Ribonucleic Acid (mRNA) kulit yang berhubungan dengan melanogenesis, mengurangi faktor melanogenesis pada tingkat transkripsi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan rumput laut coklat (P. australis) serta aktivitasnya untuk agen anti penuaan dini meliputi uji penghambatan terhadap enzim tirosinase, enzim kolagenase dan enzim elastase. Uji kualitatif dilakukan dengan pemeriksaan organoleptis, uji susut pengeringan dan KLT dengan pembanding fukosantin, sedangkan uji kuantitatif menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Pengukuran aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode Beta Caroten Bleaching (BCB) dan metode Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP). Penghambatan Elastase dan kolagenase diukur menggunakan drug discovery kit (Neutrophil elastase Colorimetric dan MMP-1, Colorimetri) mengikuti protokol dalam Enzo Life Science. Aktivitas antimelanogenik diuji melalui penghambatan enzim tirosinase. Ekstrak etanol P. australis (EPA) yang larut dalam etil asetat mengandung fukosantin 11,6 ± 0,56 μg/ml, mempunyai aktivitas antioksidan metode FRAP sebesar 7,42 μmol Fe2+ /g sampel sedangkan fraksi hasil kolom P. australis (FPA) mempunyai aktivitas antioksidan sebesar 7,21 μmol Fe2+/g sampel. Ekstrak etanol P. australis (EPA) dan fraksi hasil kolom P. australis (FPA) mempunyai kemampuan untuk pemucatan betakaroten (Betacaroten Bleaching) masing-masing sebesar IC50 54,93 ± 2,34 µg/mL (ekstrak) dan 49,50 ± 5,25 µg/mL (Fraksi). Untuk uji penuaan dini dengan aktivitas penghambatan enzim kolagenase untuk ekstrak etanol P. australis (EPA) kadar 40 ppm sebesar 93,89 ± 1,05 %, kadar 80 ppm sebesar 93,61 ± 1,88 % dan Fraksi hasil kolom P. australis (FPA) kadar 40 ppm sebesar 95,42 ± 0,42 %, untuk kadar 80 ppm sebesar 91,25 ± 4,17 %. Uji penghambatan elastase menghasilkan aktivitas inhibitor sebesar 32,88 ± 4,06 % (ekstrak etanol 40 ppm) dan 23,64 ± 3,63 % untuk (ekstrak etanol 80 ppm), sedangkan fraksi 40 ppm dan fraksi 80 ppm sebesar masing-masing 25,08 ± 2,78 % dan 10,01 ± 6,14 %. Nilai IC50 penghambatan tirosinase adalah 431,67 ± 115,21 µg/mL (Kojic acid), 209,26 ± 27,62 µg/mL (Ekstrak etanol P. australis) dan 353,49 ± 80,97 µg/mL (Fraksi hasil kolom P. australis).

Skin aging can be caused by the intrinsic factor is the aging process that happens naturally and by the extrinsic factors due to environmental influences such as sunlight, air, chemicals and environment. Exposure to sunlight, especially UVB radiation can produce free radicals and reactive oxygen species (ROS). ROS formation that exceeds the ability of the antioxidant defense system in target cells can trigger oxidative stress and oxidative damage biomolecules such as DNA and lipid membranes that trigger melanogenesis. Fucoxantin from brown seaweed has been reported to suppress the expression of Messenger Ribonucleic Acid (mRNA) associated with skin melanogenesis, reducing melanogenesis factor at the level of transcription. This study aims to determine the antioxidant activity of brown seaweed Padina australis species and activities for anti-aging agents include tests matrics metalloproteinase inhibition of the enzyme, collagenase, and elastase. Qualitative test has been conductid by organoleptic inspection, follow by test the drying shrinkage and TLC experiment with fukosantin as a standard, while the quantitative test conducted using High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Antioxidant activity measured by the method of Beta carotene bleaching (BCB) and the method of Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP). Inhibition of elastase and collagenase were measured using the drug discovery kit (Colorimetric Neutrophil elastase and MMP-1, colorimetri) in accordance with protocol in Enzo Life Science. Activities of antimelanogenic was tested through inhibition of the enzyme tyrosinase. P. australis extract containing fucoxantin 11.6 ± 0.56 μg/mL, FRAP methods have antioxidant activity of 7.42 μmol Fe2+/g sample, while the fraction of P. australis has antioxidant activity of 7.21 μmol Fe2+/g sample. The ethanolic extract (EPA) and the fraction of P. australis (FPA) have the ability in bleaching of beta-carotene (Betacaroten Bleaching) of IC50 54.93 ± 2.34 μg/mL (extract) and 49.50 ± 5.25 μg/mL (fractions). Ethanolic extract (EPA) in concentration of 40 ppm and 80 ppm have collagenase inhibitory activity of 93.89 ± 1.05 % and 93.61 ± 1.88 %, respectively while Fraction of P. australis showed collagenase inhibitory activity of 95.42 ± 0.42 % and 91.25 ± 4.17 %, respectively for concentration of 40 ppm and 80 ppm. The elastase inhibition activity of ethanolic extract (EPA) and fraction of P. australis (FPA) in concentration 40 ppm 32.88 ± 4.06 % and 25.08 ± 2.78 %, respectively while in concentration 80 ppm the result showed that the elastase inhibition activity were 23.64 ± 3.63 % (EPA) and 10.01 ± 6.14 % (FPA). The IC50 value of tyrosinase inhibition test were 431.67 ± 115.21 μg/mL, 209.26 ± 27.62 μg/mL and 353.49 ± 80.97 μg/mL, respectively for kojic acid as a standard, ethanolic extract (EPA) and fraction of P. australis (FPA).

Kata Kunci : Padina australis, fukosantin, antioksidan, anti penuaan dini