ISOLASI DAN IDENTIFIKASI PINOSTROBIN DAN PINOCEMBRIN DARI RIMPANG TEMU KUNCI (Boesenbergia pandurata (Roxb). Schlecht) SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDANNYA

OKTARIANI P, Dr.rer.nat.Nanang Fakhrudin,M.Si., Apt; Prof.Dr.Subagus Wahyuono, M.Sc., Apt

2016 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Kerusakan pada sel dan jaringan yang merupakan akar dari sebagian besar penyakit disebabkan oleh radikal bebas. Antioksidan merupakan senyawa yang mampu menghambat radikal bebas dalam tubuh manusia, sehingga kerusakan sel yang disebabkan oleh radikal bebas dapat dicegah. Senyawa yang dapat menetralisir radikal bebas adalah antioksidan. Rimpang Temu Kunci [Boesenbergia Pandurata (Roxb). Schlecht] yang oleh masyarakat digunakan untuk bumbu penyedap masakan juga mempunyai aktivitas antioksidan. Isolasi pinostrobin dilakukan dengan cara rekristalisasi. Pinocembrin diisolasi dengan kromatografi cair vakum menggunakan fase gerak etil asetat : washbensin secara gradient dan fraksi senyawa target dipisahkan dengan KLT preparatif. Kemurnian isolat ditentukan dengan KLT, pengukuran jarak lebur dan HPLC. Kemudian isolat yang diperoleh dilakukan uji aktivitas antioksidannya dengan metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power), beta-caroten bleaching, dan NO scavenging. Selanjutnya struktur kimianya dielusidasi dengan spektroskopi UV-Vis, IR, GC-MS, 1H-NMR dan 13C-NMR. Aktivitas antioksidan pinostrobin dengan metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power), beta-caroten bleaching, dan NO scavenging berturut-turut sebesar 3,68±0,43µM/g (Reducing power) ; 179,29±12,01µM (IC50) dan 469,33±13,33µM (IC50). Sedangkan pinocembrin memiliki aktivitas antioksidan sebesar 4,51±0,2µM/g (Reducing power) ; 116,29±5,68 µM (IC50) dan 474,03±13,54µM. Sedangkan aktivitas antioksidan kuersetin sebagai pembanding berturut-turut sebesar 4,91±0,53µM/g (Reducing power) ; 57,25±30,34µM (IC50) dan 286,54±10,78µM (IC50) serta asam galat sebesar 16,72±3,67µM/g (Reducing power) ; 86,85,29±8,81µM (IC50) dan 18,40±0,91µM (IC50). Pinocembrin memiliki aktivitas antioksidan lebih baik dari pada pinostrobin. Jarak lebur isolat pinostrobin 98-99°C dengan kemurnian sebesar 99,7% yang diukur dengan HPLC. Sedangkan isolat pinocembrin memiliki jarak lebur 197-198°C dengan kemurnian menggunakan HPLC sebesar 92,05%. Berdasarkan spektrum UV-Vis, IR, GC-MS, 1H-NMR dan 13C-NMR isolat terkonfirmasi sebagai pinostrobin dan pinocembrin.

The damage to cell and tissue that is the main causal factor of most diseases caused by free radicals. The antioxidant is compound which has ability in inhibiting free radicals inside the human body so that the cell damage caused by free radicals can be prevented. The compound that can neutralize free radical is antioxidant. Fingerroot rhizome (Boesenbergia pandurata (Roxb). Schlecht) used for seasoning flavor has antioxidant activity. Isolation of pinostrobin was conducted by recrystallization. Pinocembrin isolation was performed by vacuum liquid chromatography eluted with mobile phase of washbensin: ethyl acetate in gradient. The target fraction was separated by preparative TLC. The isolate purity was determined by analyzing of TLC, melting range and HPLC. Then the obtained isolates were analyzed to know the antioxidant activity using beta-carotene bleaching method, FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) and NO scavenging. Furthermore, the chemical structures were elucidated based on spectroscopic methods (UV-Vis, IR, GC-MS, 1H-NMR and 13C-NMR). The antioxidant activities of pinostrobin isolate by beta-carotene bleaching method, FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) and NO radical scavenging showed each 179.29±12.01µM (IC50); 3.68±0.43 µM/g and 469.33±13.33 µM(IC50). Meanwhile, the pinocembrin isolate had antioxidant activity of 116.29±5.68µM (IC50); 2.8±0.2µM/g and 474.03±13.54µM (IC50). The antioxidant activities of quercetin as a comparator showed each 4.91 ± 0.53 μM / g (Reducing power); 57.25± 30.34μM (IC50) and 286.54± 10.78 μM (IC50). Meanwhile, the gallic acid had antioxidant activitty of 16.72 ± 3.67 μM / g (Reducing power); 86,85,29 ± 8.81 μM (IC50) and 18.40 ± 0.91μM (IC50). The antioxidant activity of pinocembrin was better than pinostrobin. The pinostrobin isolate had melting range numbered 98-99°C with the purity of 99.7% by HPLC. Then, the pinocembrin isolate had melting range numbered 197-198°C with the purity of 92.05% by HPLC. Based on the spectrum of UV-Vis, IR, LC-MS, 1H-NMR and 13C-NMR, the isolates were confirmed as pinostrobin and pinocembrin.

Kata Kunci : Boesenbergia pandurata (Roxb) Schlect, isolasi, beta-caroten bleaching, FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power), NO scavenging