Efek Ekstrak Metanolik Lumut Hati (Marchantia polymorpha L.) Terhadap Ekpresi Heat Shock Protein 70 Kultur Sel HeLa

SAYATI MANDIA, Dr. Bambang Retnoaji, M.Sc; Dr. biol-hom. Nastiti Wijayanti, M. Si

2015 | Tesis | S2 Biologi

Lumut hati (Marchantia polymorpha .L) merupakan salah satu tanaman yang mempunyai kandungan senyawa aktif yang tinggi seperti flavonoid, terpenoid, fenolik yang berpotensi sebagai antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk melihat efektivitas ekstrak lumut hati M. polymorpha L. terhadap ekspresi HSP 70, viabilitas, induksi apoptosis dan pengukuran nitrit oksida (NO). Lumut hati diekstrak dengan metanol 80%. Sel HeLa digunakan sebagai model sel kanker. Sel diinkubasi selama 48 jam pada medium RPMI-1640, kemudian diberi 8 perlakuan dengan konsentrasi yaitu kontrol negatif tanpa perlakuan, kontrol positif (doksorubisin 7 ug/mL)ntrasi lumut 50, 100, 150, 200, 250, 300 ug/mL diantara IC50 selama 24 jam. Pengujian kandungan senyawa aktif lumut hati dilakukan menggunakan metode KLT. Uji viabilitas menggunakan WST-1. Pengamatan apoptosis sel menggunakan mikroskop fluoresen. Pengukuran kadar nitrit oksida menggunakan metode griess assay. Ekspresi HSP 70 dideteksi dengan metode Western Blotting. Data penelitian dianalisis menggunakan Kruskawallis dengan uji lanjut Gomez Howell dan Bronfenni. Kandungan golongan senyawa aktif yang terdeteksi berupa flavonoid, terpenoid dan fenolik. Ekstrak lumut menghambat 50% pertumbuhan pada konsentrasi 186 ug/mL dan mampu menginduksi apoptosis pada sel HeLa. Kadar nitrit oksida menurun setelah perlakuan dan terjadi penurunan ekspresi HSP70 setelah pemberian ekstrak lumut hati.

Liverwort (Marchantia polymorpha L) is one of plant that has high active compound such as flavonoid, terpenoid, fenolik that have potential as anticancer. This research aimed to determine the effect of liverwort extract to HSP 70 expression, viability, apotosis induction and nitrit oxide concentration. Liverworts leave were extracted using methanol solvent. HeLa cell line is used as model of treatment. Cell were incubated 48 hours in RPMI-1640 and then treated with eight concentration of liverworts extract such negative control, positive control (doksorubsin 7 ug/mL) and 50, 100, 150, 200, 250, 300 ug/mL extract between IC50 concentration. Test of active compound of liverwort using KLT method, viability Hela cell using WST-1 method, apoptosis cell using fluoresen microscop. Nitrit oxide measurement using griess assay method. Heat shock protein 70 were detected using western blot method. Analyz data used kruskawallis continued Gomez Howell and Bronfenni. Liverwort revelead the presence of flavonoid, terpenoid and phenolic. Cytotoxity assay showed hat the growth inhibition of HeLa in concentration 186 ug/mL and potential to induced HeLa cell line apoptosis. Concentration of nitrit oxide and quantification protein 70kDa of HeLa cell line were decreased after treatment of liverwort methanolic extract.

Kata Kunci : Lumut Hati, antikanker, sel HeLa, heat shock protein 70