Isolasi, seleksi dan identifikasi bakteri pendegradasi fraksi aromatik lumpur minyak bumi

HIRANURPIKA, Pilkeska, Ir. Irfan D. Prijambada, M.Eng.,PhD

2002 | Tesis | S2 Bioteknologi

Kemampuan mikroorganisme merombak senyawa hidrokarbon aromatik lumpur minyak bumi dapat digunakan untuk menangani pencemaran lingkungan yang disebabkan oleh lumpur minyak tersebut melalui proses biodegradasi. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan isolat bakteri yang mampu mendegradasi senyawa hidrokarbon aromatik dalam lumpur minyak bumi. Sumber isolat adalah tanah hutan jati, tanah hutan bakau, tanah gambut dan kompos. Isolasi dilakukan dengan menumbuhkan mikroorganisme yang terdapat dalam tanahkompos tersebut dalam medium mineral bushel1 hass (MMBH) cair yang mengandung 1% fiaksi aromatik sebagai satu-satunya sumber karbon, diperoleh dari hasil ekstraksi dan fiaksinasi lumpur minyak UPDN IV Pertamina Cilacap dan UPDN V Pertamina Balikpapan, Kalimantan. Mikroorganisme yang tumbuh selanjutnya ditabur dalam medium nutrien agar (NA). Isolat-isolat yang diperoleh selanjutnya diseleksi secara kualitatif dengan menumbuhkannya dalam MMBH seperti di atas. Isolat yang mampu tumbuh paling baik dipilih dan diuji secara kuantitatif kemampuannya mendegradasi fiaksi aromatik lumpur minyak menggunakan kromatografi gas. Identifikasi isolat dilakukan berdasarkan hasil uji sifat-sifat morfologis, fisiologis dan biokemisnya dengan mengacu pada Bergey 's Manual of Determination Bacteriology (Holt et al., 1994) dan berdasarkan urutan basa gen 16s rRNAnya. Diperoleh empat isolat bakteri yaitu CH,KH (dari tanah hutan), CG dan KG (dari tanah gambut) yang semuanya termasuk dalam genus Acinetobacler. Homologi urutan basa gen 16s rRNA menunjukkan bahwa isolat CH adalah calcoaceticus var. anitratus (similaritas 97%), isolat CG adalah Acinetobacter calcoaceticus var. anitratus (similaritas 950/9), isolat KH adalah Acinetobacter sp (similaritas 98%) dan isolat KG adalah dcinetobacter baumannii.(similaritas 94%). Isolat CH dan CG mampu m e n d a n kandungan fraksi aromatik minyak Cilacap sebesar 94,997% dan 86,63%. Isolat KH dan KG mampu menurunkan kandungan fraksi aromatik lumpur minyak Kalimantan sebesar 34,7% dan 13,3%.

The capability of microorganisms to degrade aromatic hydrocarbpn of oil sludge can be used to overcome environmental pollution due to the oil sludge, through biodegradation. The objective of this research was to isolate aromatic hydrocarbon degrading bacteria. Soil collected from locations covered with teak wood and mangrove vegetation, peat soil, and compost were used as source of isolates. lsolatipn was done by culturing existing microorganisms in the soil/compost in Bushnell-uass Mineral Broth (BHMB) containing 1 % oil sludge aromatic compounds as a sole carbon source which extracted and fractionated from oil sludge of UPDN IV Pertaminsf Cilpcap and UPDN V Pertamina Balikpapan. The culture was then spread on to Nutrient Agar (NA). The obtained isolates were selected qualitatively based on theirs capability to degrade aromatic hydrocarbon. The selected isolates were then tested qualitatively their capability to lowered aromatic hydrocarbon concentration in the BHMB using gas chromagrafic analysis. ldentification of the selected isolates was conducted based on Bergey's Manual of Determination Bacteriology (Holt et al., 1994) and the nucleotide sequence of theirs 16s rRNA genes. Four aromatic hydrocarbon degrading bacteria were obtained, i.e.; CH and KH (from teak wood vegetated soil), CG and KG (from peat soil) which are the member of Acinetobucter. Homology of 16s rRNA genes indicated that CH isolate IS Acinetobucter culcouceticus vur unitrutus (97% similarity), isolate CG is Acinetobucter culcouceticus vur unitrutus (95% similarity), KH isolate is Acinetobucter sp (98% similarity) and KG isolate is Acinetobucter buuniunni (94% similarity). CH and KH isolates reduced 94,97% and 86,63% of the oil sludge aromatic hydrocarbon of Cilacap. CG and KG isolates reduced 34,7% and 13,3% of the oil sludge aromatic hydrocarbon of Kalimantan.

Kata Kunci : Bioteknologi,Bakteri Pendegradasi Senyawa Hidrokarbon Aromatik, is01 ati on, identification, soil bacteria, biodegradation, aromatic hydrocarbon, oil sludge