LEVEL EKSPRESI mRNA GEN CASPASE-3, -8, dan -9 JARINGAN TUMOR TIKUS (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769) DENGAN PERLAKUAN MEDAN LISTRIK STATIS

M MIFTAH JAUHAR, Dra. Rarastoeti Pratiwi, M.Sc., Ph. D; Firman Alamsyah, Ph.D; Woro Anindito Sri Tunjung, M.Sc., Ph.D

2021 | Skripsi | S1 BIOLOGI

Terapi dengan medan listrik statis memiliki potensi besar untuk dikembangkan sebagai terapi kanker tanpa menimbulkan efek samping. Terapi ini memiliki peran utama dalam penghambatan sel kanker dengan memicu terjadinya kematian sel. Kematian sel melalui program apoptosis penting untuk diteliti guna mengetahui efektivitas alat terapi. Apoptosis diregulasi oleh caspase-8 melalui jalur eksternal, caspase-9 melalui jalur internal, dan caspase-3 sebagai eksekutor. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui level ekspresi mRNA gen caspase-3, -8, dan -9 pada jaringan normal dan tumor payudara tikus Rattus norvegicus terinduksi DMBA yang terpapar medan listrik statis frekuensi 150 kHz intensitas 18 Vpp dari kandang Electro-Capacitive Cancer Therapy (ECCT). Tikus dikelompokkan dalam 4 perlakuan yakni Non Induksi - Non Terapi (NINT), Non Indukti Terapi (NIT), Induksi Non Terapi (INT), dan Induksi Terapi (IT). Isolasi RNA dan sintesis cDNA dilakukan dengan protokol Directzol-KIT dan iScript Mix secara berurutan. Tingkat ekspresi gen caspase-3, -8, dan -9 dilakukan dengan alat qPCR. Analisis statistik menggunakan software Prism versi 9.0.0. Berdasarkan hasil yang diperolah, diketahui ekspresi gen caspase-3, -8, dan -9 kelompok IT dan INT mengalami downregulasi terhadap NINT. Kesimpulan yang diperoleh adalah paparan medan listrik statis 150 kHz, 18 Vpp dari kandang ECCT secara umum tidak memberikan pengaruh signifikan pada ekspresi relative mRNA gen caspase-8, dan -9. Level ekspresi mRNA gen caspase-3 terjadi penurunan signifikan antara kelompok dengan jaringan payudara normal tanpa terapi dengan jaringan tumor payudara yang diterapi.

Therapy using field static electricity has the high potential to develop as cancer therapy without give any significant bad impact in biological process. A death cell through apoptotic program is important to be researched to know the effectiveness of therapy's method especially its role in the retardation of cancer cells. Apoptosis is regulated using caspase-8 throughy external pathway, caspase-9 through internal pathway, and caspase-3 as executor caspase. The aim of this research is to know the mRNA gene expression level of caspase-3, -8, and -9 in normal and tumor tissue of rats Rattus norvegicus which are given using DMBA that expose to field static electricity. The field static electricity has frequency in 150 kHz and intensity in 18 Vpp from Electro-Capacitive Cancer Therapy (ECCT) cage. The rats were classified within 4 treatment group, Non Induction - Non Therapy (NINT), Non Induction Therapy (NIT), Induction Non Therapy (INT), and Induction Therapy (IT). RNA isolation and cDNA synthesis are done following the protocol of Directzol-KIT and iScript Mix respectivelly. Level of gene expressions were counted using qPCR. Analytical of statistics were analysed using Prism version 9.0.0. For the result, gene expression of caspase-3, -8, and -9 in both of INT and IT downregulated to NINT, however these are not significant. In conclusion, therapy of field static electricity (150 kHz and 18 Vpp) is not able to give significant change of expression level caspase-8, and -9. However, there is significant decrease of caspase-3 expression level between tumor tissue with therapy compare to normal tissue without therapy.

Kata Kunci : apoptosis, caspase-3, caspase-8, caspase-9, medan listrik