Pertumbuhan Tanaman Transforman Phalaenopsis amabilis (L.) Blume Pembawa Gen 35S::AtRKD4 secara Ex Vitro

NAUFAL GHOZI A P, Prof. Dr. Endang Semiarti, M.S., M.Sc.

2020 | Skripsi | S1 BIOLOGI

Anggrek Phalaenopsis amabilis (L.) Blume adalah bunga nasional Indonesia. Perbanyakan anggrek melalui embriogenesis somatik dan transformasi genetik menggunakan gen embrio Arabidopsis thaliana RWP-RK Domain-containing4 (AtRKD4) dari tanaman model Arabidopsis thaliana mampu meningkatkan jumlah produksi. Tujuan dari penelitian ini adalah mendeteksi integrasi gen 35S::AtRKD4 pada genom anggrek P. amabilis transforman pembawa gen 35S::AtRKD4 dan membandingkan pertumbuhan anggrek P. amabilis transforman pembawa gen 35S::AtRKD4 dengan P. amabilis non-transforman pada lingkungan ex vitro. Pengukuran pertumbuhan tanaman meliputi kecepatan pertumbuhan, jumlah daun, panjang daun, lebar daun, jumlah akar, panjang akar dan diameter akar. Data dianalisis menggunakan Microsoft Excel 2010 dan SPSS Statistics 26. Deteksi insersi transgen pada genom tanaman dilakukan dengan isolasi total DNA genom dengan Cetyltrimethyl Ammonium Bromide (CTAB). DNA Genom tanaman diamplifikasi dengan Polymerase Chain Reaction (PCR) menggunakan primer spesifik AtRKD4 dan primer gen HPT, serta primer gen ACTIN sebagai kontrol internal. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa gen AtRKD4 (198 bp) teramplifikasi pada genom anggrek P. amabilis transforman pembawa gen 35S::AtRKD4 dan tidak terdapat perbedaan pertumbuhan dan fenotipe yang signifikan antara anggrek P. amabilis transforman pembawa gen 35S::AtRKD4 dengan P. amabilis non-transforman pada lingkungan ex vitro.

Phalaenopsis amabilis (L.) Blume orchid is Indonesian national flower. Somatic embryogenesis and genetic transformation of the model plant Arabidopsis thaliana embryo gene Arabidopsis thaliana RWP-RK Domain-containing4 (AtRKD4) can increase P. amabilis crop production. Objectives of this research were to detect the integration of the 35S::AtRKD4 gene in the genome of the P. amabilis transformant carrying 35S::AtRKD4 and to compare the growth of P. amabilis transformant carrying 35S::AtRKD4 with P. amabilis non-transformant under ex vitro conditions. Measurement of plant growth included life sustainability, total number of leaves, leaf length, leaf width, total number of roots, root length and root diameter. Data were analyzed using Microsoft Excel 2010 and SPSS Statistics 26. DNA isolation from the genome was carried out using Cetyltrimethyl Ammonium Bromide (CTAB). DNA was amplified by Polymerase Chain Reaction (PCR) using specific primers AtRKD4, HPT and ACTIN. The results showed the AtRKD4 genes (198 bp) was amplified from P. amabilis transformant carrying 35S::AtRKD4. This proves that transgenes have been integrated into the P. amabilis transformant carrying 35S::AtRKD4 genome and function normally and plant forms unchanged as in non-transformant plants. There is a stable phenotype with no change in growth and development of plants between P. amabilis transformant carrying 35S::AtRKD4 and P. amabilis non-transformant under ex vitro conditions.

Kata Kunci : Anggrek, Arabidopsis, AtRKD4, Phalaenopsis amabilis (L.) Blume