Efek Ekstrak Kloroform Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.) terhadap Pertumbuhan Fibroblast Mencit (NIH3T3 cell line)

BENITA AYU C J, Ardaning Nuriliani, S.Si., M.Kes.

2020 | Skripsi | S1 BIOLOGI

Daun sirih merah mengandung minyak atsiri yang berpotensi sebagai bahan dasar pembuatan insektisida alami. Namun sampai saat ini, belum diketahui efek yang ditimbulkan terhadap organisme bukan target khususnya mamalia. Daun sirih merah diekstraksi dengan pelarut kloroform. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari sitotoksisitas ekstrak kloroform daun sirih merah terhadap fibroblast mencit (NIH3T3 cell line). Metode yang digunakan yaitu uji sitotoksisitas dengan MTT dan pengamatan morfologi sel yang mengalami kematian dengan pewarnaan May-Grunwald-Giemsa, dan analisis kematian sel dengan Flowcytometric. Konsentrasi ekstrak yang digunakan yaitu 1000; 500; 250; 125; 62,5; 31,25; 15,625; 7,8125 mikrogram per mililiter, kontrol sel, kontrol medium, dan kontrol DMSO 1%. Hasil dianalisis dengan Oneway ANOVA dan analisis probit. Efek ekstrak kloroform daun sirih merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.) terhadap penghambatan pertumbuhan fibroblast mencit (NIH3T3 cell line) memperlihatkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak semakin rendah persentase sel hidup. Secara mofologis dengan pewarnaan May-Grunwald-Giemsa menunjukkan bahwa persentase sel apoptosis tertinggi pada konsentrasi 250 mikrogram per mililiter yaitu 25,83±6,096% dan persel sel nekrosis tertinggi 1,04±0,696%. Berdasarkan hasil Flowcytometri kematian sel didominasi melalui jaras nekrosis >90%. Ekstrak kloroform daun sirih merah dapat menghambat pertumbuhan fibroblast mencit (NIH3T3 cell line) dengan nilai IC50 191,886±0,197 mikrogram per mililiter dan tergolong cukup toksik. Pada konsentrasi 125 dan 250mikrogram per mililiter dapat menginduksi kematian sel melalui jaras nekrosis.

Red betel leaf contains essential oil that potential as natural insecticides. However, the effect of red betel leaf extract on the non-target organism was unknown especially mammal. This study aimed to determine chloroform extract of red betel leaf cytotoxicity to mouse fibroblast (NIH3T3 cell line). Cytotoxicity test with MTT Assay and death cell morphology observed with May-Grunwald-Giemsa Staining and spesifically analysed with Flowcytometric. Concentration of extract that used in this research were 1000; 500; 250; 125; 62,5; 31,25; 15,625; 7,8125 mikrogram/mililiter and DMSO 1%. Result analyzed with one way ANOVA and probit test. High concentration of chloroform extract of red betel leaf reduced viability of NIH3T3 cell line. Based on morphological analysis shows highest percentage of apoptotic cell is 25,83±6,096% (250 mikrogram/mililiter) and highest percentage of necrotic cell is 1,04±0,696%. Baseed on flowcytometric analysis, death of cell >90% caused by necrosis. Based of this research concluded that, chloroform extract of red betel leaf could inhibit fibroblast growth with value of IC50 191,886± 0,197 mikrogram/mililiter are considered moderate toxic. Concentration 125 and 250 mikrogram/mililiter caused death of cell with necrosis pathway.

Kata Kunci : Chloroform extract Piper crocatum Ruiz & Pav.'s leaf, NIH3T3 cell line, apoptosis, and necrosis.