TEKNIK PEMBUATAN DAN EVALUASI PREPARAT HISTOLOGI DENGAN PEWARNAAN HEMATOKSILIN EOSIN DI LABORATORIUM HISTOLOGI DAN BIOLOGI SEL FAKULTAS KEDOKTERAN UGM DAN NATIONAL LABORATORY ANIMAL CENTER (NLAC) MAHIDOL UNIVERSITY

ARI INDRAWATI, Drh. Clara Ajeng Artdita, M.Sc

2017 | Tugas Akhir | D3 KESEHATAN HEWAN SV

Pembuatan preparat jaringan harus dipahami secara benar oleh seorang laboran agar tidak terjadi kesalahan teknis yang dapat menganggu pengamatan preparat dan diagnosa. Tujuan penyusunan tugas akhir ini adalah mengetahui dan memahami langkah-langkah pembuatan sediaan preparat histologi dengan pewarnaan Hematoksilin Eosin serta mengevaluasi hasil pembuatan dan pewarnaan preparat. Pembuatan preparat dilaksanakan di Laboratorium Histologi dan Sel Fakultas Kedokteran UGM dan National Laboratory Animal Center (NLAC) Mahidol University. Bahan yang digunakan di Laboratorium Histologi yaitu air, akuades / RO water, formalin 10% / PBS Formalin, alkohol, etanol, xilol / alkohol toluene dan toluen murni, parafin, gelatin, entelan DPX, larutan hematoksilin dan eosin, acid alkohol, bluing solution. Tahapan pembuatan preparat dimulai dari eutanasi, nekropsi, fiksasi, trimming, dehidrasi, penjernihan, infiltrasi parafin, pengeblokan, pemotongan dan pewarnaan. Pembuatan preparat jaringan yang dikerjakan secara manual atau dengan alat otomatis hasil preparat jaringannya hampir sama, pengerjaan dengan alat otomatis hasilnya lebih cepat dan tenaga yang dibutuhkan tidak banyak. Hasil pewarnaan hematoksilin eosin adalah inti sel terwarnai biru keunguan dan sitoplasma terwarnai merah muda atau merah. Hasil dari pengamatan preparat jaringan kerusakan yang terjadi diantaranya adalah jaringan mengalami sobek, tergores, pecah, lipatan, pewarnaan yang kurang, atau sebagian jaringan ada yang hilang, dan terdapat spot hitam pada preparat jaringan. Beberapa penyebab kerusakan diantaranya akibat dari tekanan berlebih pada preparat, pisau mikrotom yang tumpul, suhu waterbath yang terlalu rendah atau tinggi, pemrosesan jaringan yang salah seperti fiksasi, infiltrasi parafin serta embedding, reagen dan larutan warna yang kadaluarsa serta tidak disaring terlebih dahulu serta kesalahan teknis karena kurang teliti yang dilakukan oleh laboran.

Tissue preparations technique should be understood correctly by a laboratory technician in order to avoid technical mistakes and disruption in preparate observation and diagnoses. The purpose of drafting of this final paper is to know and to understand the steps of making preparate histology using hæmatoxylin eosin staining. Tissue preparation technique has been done in the Laboratory Histology and Cell Biology FK UGM and National Laboratory Animal Center (NLAC) Mahidol University. The material that used in the the Laboratory Histology of them water, aquades / ro water, formalin 10 % / formalin PBS 10%, alcohol, ethanol, xylol, alcohol toluene and toluen (pure), paraffin, gelatin, entelan DPX, and hæmatoxylin eosin solution, acid alcohol, and bluing solution. The stage of tissue preparations started from euthanasi, necropsy, fixation, trimming, dehydration, clearing, embedding, blocking, sectioning and staining. The result of preparation preparate tissue manually or using an automatic instrument showed same results of preparat tissue. Besides, using an automatic instrument is faster and not required too much energy so the laboratory technician can do another tasks in the making of preparat tissue. The result from the haematoxylin eosin staining showed that cell nucleus turned into purplish blue color and cytoplasm to pink or red. The observed damaged during tissue preparations including : tissue separation, crackling, folding, stain precipitate, knife marks, perforated / some body tissues missing. Some damage caused by remaining pressure, knife microtome bluntness, waterbath temperature was too high or too low, processing tissue wrongly during fixation, paraffin infiltration and embedding, expiread reagen and color solution and not filtered first and technical error because they are not thoroughly done by laboratory technician.

Kata Kunci : Histoteknik, Hematoksilin eosin, preparat histologi, evaluasi preparat / Histotechnique, hæmatoxylin eosin, preparate histology, evaluation preparate