Validasi Analisis Tetrasiklin menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) sebagai Langkah Awal Deteksi Residu Tetrasiklin pada Produk Daging

NI MADE AYUDITA A.L.W., Dr. drh. R. Gagak Donny Satria, M.P., M.Pd.

2017 | Skripsi | S1 KEDOKTERAN HEWAN

Tetrasiklin merupakan antibiotik yang digunakan sebagai imbuhan pakan untuk hewan ternak dan dapat menimbulkan residu pada jaringan otot apabila penggunaannya tidak sesuai aturan. Metode analisis tetrasiklin dalam produk daging telah banyak dikembangkan, salah satunya adalah kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Penelitian ini bertujuan untuk melakukan validasi metode analisis tetrasiklin menggunakan alat KCKT merk Shimadzu 6.1, kolom C18 150 mm x 4,6 mm, fase gerak metanol, asetonitril, asam oksalat 0,125% dengan perbandingan 80 : 4 : 16, laju alir fase gerak 1 mL/menit, suhu 30 derajat C, dan panjang gelombang detektor UV-Vis 355 nm. Analisis hasil didasarkan pada parameter spesifisitas, presisi, akurasi, linearitas, batas deteksi, dan batas kuantifikasi. Hasil penelitian menunjukkan rerata luas area puncak sampel tetrasiklin konsentrasi 0,001 mikrogram/mL, 0,025 mikrogram/mL, 0,05 mikrogram/mL, 0,075 mikrogram/mL, dan 0,1 mikrogram/mL berturutturut adalah 7.752,33, 10.996, 16.555, 23.139,33, dan 29.177,33 pada waktu retensi 1-2 menit. Presisi menunjukkan nilai persentase relative standard deviation (RSD) kurang dari atau sama dengan 2% pada semua tingkatan konsentrasi. Nilai akurasi berada dalam kisaran 90%-110% pada konsentrasi 0,05 mikrogram/mL, 0,075 mikrogram/mL, dan 0,1 mikrogram/mL, namun konsentrasi 0,001 mikrogram/mL dan 0,025 mikrogram/mL memiliki nilai akurasi di luar kisaran tersebut. Linearitas menghasilkan persamaan linear y = 221.867x + 6.785,6 dengan nilai R = 0,9952. Batas deteksi dan batas kuantifikasi berturut-turut adalah 0,011183359 mikrogram/mL dan 0,037278 mikrogram/mL. Kesimpulan yang diperoleh yakni metode yang digunakan memiliki validitas yang baik dari segi spesifisitas, presisi, dan linearitas. Batas deteksi dan batas kuantifikasi tidak mencapai nilai batas maksimum residu pada sampel. Akurasi tidak menunjukkan validitas yang baik pada konsentrasi 0,001 mikrogram/mL dan 0,025 mikrogram/mL.

Tetracycline is a common antibiotic used as feed additives in livestock and can causes residues in animal tissue if the usage is uncontrolled. Analytical methods of tetracycline on meat product have been developed, one of them is using high performance liquid chromatography (HPLC). The objective of this research was to validate analysis method using HPLC device Shimadzu 6.1, C18 column with 150 mm x 4,6 mm size, mobile phase of methanol, acetonitrile, oxalic acid 0,125% with 80 : 4 : 16 in ratio, mobile phase flow rate 1 mL/minute, 30 degree C temperature, and UV-Vis detector wavelength 355 nm. Result analysis was based on specificity, precision, accuracy, linearity, limit of detection, and limit of quantification. The results showed that average peak area of the tetracycline samples with concentration 0,001 microgram/mL, 0,025 microgram/mL, 0,05 microgram/mL, 0,075 microgram/mL, and 0,1 microgram/mL were 7.752,33, 10.996, 16.555, 23.139,33, and 29.177,33 respectively with retention time 1-2 minutes. Precision showed the percentage of relative standard deviation (RSD) value were less than or equal to 2% on all levels of concentration. Percentage of accuracy showed 90%-110% on the concentration of 0,05 microgram/mL, 0,075 microgram/mL, and 0,1 microgram/mL, but concentration of 0,001 microgram/mL and 0,025 microgram/mL had accuracy value beyond the range. Linearity produced linear equation y = 221.867x + 6.785,6 with R = 0,9952. Limit of detection and limit of quantification were 0,011183359 microgram/mL and 0,037278 microgram/mL respectively. The conclusion was the method that is developed has good validity based on specificity, precision, and linearity. Limit of detection and limit of quantification did not reach maximum residue limit of sample. Accuracy validity did not show good mark on the concentration of 0,001 microgram/mL and 0,025 microgram/mL.

Kata Kunci : validasi, tetrasiklin, KCKT