IMUNOMODULATOR EKSTRAK DAUN GAHARU Aquilaria malaccensis Lamk. DAN Gyrinops versteegii (Gilg.) Domke SECARA IN VITRO

ANJAR SULISTYANI, Dr. Tri Rini Nuringtyas, S. Si, M. Sc; Dr. biol. hom. Nastiti Wijayanti, S.Si, M. Si

2016 | Tesis | S2 Biologi

Pemanfaatan daun gaharu sebagai obat herbal sudah dilakukan sejak dahulu, namun belum banyak pembuktian secara ilmiah terhadap bioaktivitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui imunomodulator daun gaharu dari 2 spesies Aquilaria malaccensis dan Gyrinops versteegii secara in vitro. Pada penelitian ini telah dilakukan penentuan aktivitas golongan senyawa yang terkandung dalam fraksi potensial. Ekstrak kloroform, etanol dan air hasil soxhletasi bertingkat diuji sitotoksisitasnya terhadap sel makrofag. Sel makrofag diisolasi dari peritoneum mencit strain Balb/c kemudian dikultur dalam medium RPMI dan diperlakukan dengan ekstrak kloroform, etanol dan air daun A. malaccensis dan G. versteegii dengan konsentrasi 50 dan 100 µg/mL. Aktivitas dan kapasitas fagositosis dihitung menggunakan mikroskop dilengkali optilab dengan perbesaran 400X. Ekstrak potensial difraksinasi menggunakan campuran eluen dengan tingkat kepolaran yang berbeda. Fraksinasi diuji sitotoksik dilanjutkan dengan uji potensial fraksi terhadap aktivitas dan kapasitas fagositosis sel makrofag dengan senyawa pembanding Quercetin. Selanjutnya dilakukan uji perbandingan ekstrak potensial dengan fraksi potensial dengan pembanding Imboost® dan Quercetin. Selanjutnya fraksi potensial di KLT untuk menentukan golongan senyawa bioaktif. Uji sitotoksik menghasilkan ekstrak air paling toksik dengan CC50 119 µg/mL. Ekstrak etanol A. malaccensis berpotensi lebih baik dari ekstrak yang lain sebagai imunomodulator. Hasil fraksinasi tidak menimbulkan toksik sel makrofag. Fraksi VIII yang merupakan hasil elusi dari pelarut etil asetat:methanol dengan perbandingan 3:7 adalah fraksi terbaik sebagai imunomodulator. Hasil KLT Fraksi VIII adalah senyawa bioaktif berupa alkaloid, fenol, flavonoid, saponin, tannin dan terpen. Diduga senyawa-senyawa ini yang bersinergi meningkatkan aktivitas dan kapasitas fagositosis sel makrofag sebagai imunomodulator.

Agarwood leaves has been traditionally used as herbal medicine however scientific report on this study is still very few. The objectives of this research was to analyse agarwood leaves of two species such as Aquilaria malaccensis and Gyrinops versteegii as an immunomodulator agent and determination of compounds contained in potential fractions. Chloroform, ethanol and water extract resulted soxhletasi's process, tested cytotoxicity against macrophages. Cells were isolated from peritoneal macrophages of mice strain Balb / c then cultured in RPMI medium and treated with the extract of chloroform, ethanol and water leaves of A. malaccensis and G. versteegii with concentrations of 50 and 100 µg / mL .Activities and phagocytic capacity was calculated using microscope and optilab with a magnification of 400X. Potential extract fractionated with an eluent increasing the level of polarity. The results of cytotoxicity of fractionation followed by a test of potential fractions on the activity and phagocytic capacity of macrophages and using Quercetin as a compound comparation. Furthermore, the comparative test between a fraction of potential and extract of potential by comparison ImboostÃ�® and Quercetin. Potential test results to determine the fraction in TLC group of bioactive compounds. The citotoxicity test resulted an aqueous extracts of the most toxic to the CC50 119 mg / mL. The ethanol extract A. malaccensis potentially better than the other extracts as immunomodulator. Results fractionation does not cause toxic macrophage cells. Fraction VIII is the best fraction as immunomodulator. TLC results from fractions VIII are bioactive compounds such as alkaloids, phenols, flavonoids, saponins, tannins and terpenes. These compounds which together increase the activity and phagocytic capacity of macrophages as an immunomodulator.

Kata Kunci : Aquilaria malaccensis, Gyrinops versteegii, immunomodulatory, machrophage and secondary metabolities