Mekanisme antiproliferatif isolat flavonoid daun Sambung Nyawa (Gynura procumbens (lour.) Merr.) terhadap Sel T47D
MARYATI, Dr. Edy Meiyanto, M.Si.,Apt
2006 | Tesis | Ilmu FarmasiKanker merupakan salah satu penyakit yang menyebabkan angka kematian cukup tinggi. Kanker payudara menduduki peringkat kedua sebagai penyakit berbahaya pada wanita setelah kanker rahim. Oleh karena itu penelitian untuk menemukan alternatif obat kanker payudara perlu terus dilakukan. Salah satu tumbuhan yang dapat dikembangkan untuk kemoprefentif adalah Gynura procumbens (Lour.) Merr. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiproliferatif dan mekanisme penghambatan pertumbuhan sel kanker payudara (T47D) oleh isolat flavonoid daun G. procumbens. Isolat flavonoid diperoleh dengan KLT preparatif hasil kromatografi kolom fraksi etil asetat ekstrak etanolik daun G. procumbens. Deteksi flavonoid dilakukan dengan pereaksi semprot sitroborat. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT, sedangkan efek isolat terhadap proliferasi sel diamati dengan metode direct counting. Efek isolat pada apoptosis diamati dengan doublestainning menggunakan etidium bromida-akridin oranye. Ekspresi protein pemicu terjadinya apoptosis diamati dengan immunositokimia. Kromatografi kolom menghasilkan dua fraksi yang positif dan dominan mengandung flavonoid yaitu fraksi XII dan XIII. Fraksi tersebut mempunyai tiga bercak pada kromatografi lapis tipis, dimana isolat A merupakan flavonoid. Hasil uji sitotoksik menunjukan nilai IC50 isolat A adalah 98 μg/ml, sedangkan fraksi XII-XIII dan fraksi etil asetat mempunyai aktivitas sitotoksik yang lebih rendah, dengan IC50 berturut-turut 133 μg/ml dan 248 μg/ml. Pada konsentrasi 50 μg/ml, isolat A menunjukkan efek antiproliferatif dan mampu memperpanjang doubling time. Isolat A memacu terjadinya apoptosis pada sel T47 dengan meningkatan ekspresi p53 dan Bax.
Cancer is the most causing death disease in the world. Breast cancer is the second causing death in women after uterus cancer. Therefore, research to develop breast cancer drug is important. Gynura procumbens (Lour.) Merr. is one of the potential plant that can be developed as cancer chemopreventive agent.The aim of this research is to examine an antiproliferative effect of flavonoid isolated from G. procumbens leaves and to study the inhibitory mechanism of growing T47D cells. The flavonoid was isolated using TLC preparative of the fractions collected from column chromatography of ethyl acetate fraction of etanolic extract. The isolated flavonoid was comfirmed using citroborate reagent and subjected to cytotoxic activity test using MTT method against T47D cells. The effect of isolated flavonoid on cell proliferation was observed by direct counting method. The effect of isolated flavonoid on apoptosis was observed by doublestainning method using ethidium bromide-acridyne orange. Protein markers for apoptosis was measured by immunocytochemistry. Column chromatography resulted in two dominant flavonoid containing fractions (XII and XIII fractions). These fractions contained 3 spots on TLC and the isolate A was identified as flavonoid. Isolate A performed cytotoxic activity with IC50 of 98 μg/ml, whereas XII-XIII fractions and ethyl acetate fraction had lower cytotoxic activities with IC50 of 133 μg/ml and 248 μg/ml, respectively. At the concentration of 50 μg/ml, isolate A exhibited antiproliferative effect and prolonged the doubling time of the growing cells. The isolate A induced apoptosis of T47D cells by upregulating of p53 and Bax.
Kata Kunci : Obat Kanker Payudara,Daun Sambung Nyawa,Isolat Flavonoid, Gynura procumbens, flavonoid, antiproliferative, apoptosis.